细胞毒性检测的原理及方法—源井生物

毒性检测

细胞毒性（cell cytotoxicity）是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件，不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测，比如药物筛选。技术原理正常细胞代谢旺盛，其线粒体内的琥珀酸脱氢酶，可将四唑盐类物质（如 MTT、XTT、WST-1和WST-8等 ）还原为紫色结晶状物质，沉积在细胞周围，然后通过酶标仪读取OD值，从而检测到细胞增值状态。
Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）是一种基于WST-8（Water Soluble Tetrazolium-8）而广泛应用于细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒，可用于简便而准确的细胞毒性分析。
其基本原理为：WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞毒性分析。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。结果示例参考文献
Liu, Qing-Hua et al. “Reduced expression of annexin A1 promotes gemcitabine and 5-fluorouracil drug resistance of human pancreatic cancer.” Investigational new drugs vol. 38,2 (2020): 350-359. doi:10.1007/s10637-019-00785-5服务周期及结果检测细胞毒性的其他方法