小林红曲事件提示传统发酵产品的潜在风险防范

由于日本小林的红曲产品事件。红曲被大家关注。中药红曲为曲霉科真菌紫色红曲霉Monascus purpureus Went的菌丝体及孢子，经人工培养，菌丝在粳米内部生长，使整个米粒变为红色”，由此而得名。其功能健脾和胃消食、活血化瘀止痛，主治食积饱胀、赤白下痢、产后恶露不净、瘀滞腹痛、跌打损伤。红曲为食疗两用的传统中药材，是中华民族的一项重大发明，历史悠久。红曲的起源众说纷纭，目前有汉代起源说、唐朝起源说、唐宋之间起源说和宋朝以前起源说之争”I。唐徐坚《初学记》中记载：“王粲七释日：西旅游梁，御宿素餐，瓜州红曲参糅相拌，软滑膏润，入口流散。”据笔者考证，东汉王粲的诗赋“七释”应属可信，对红曲之名最早出现在东汉应无怀疑。由此推之，红曲在汉代已被发明。

1978年，默沙东在土曲霉中分离得到具有降血脂作用的HMG-CoA还原酶抑制剂洛伐他汀( Lovastatin)。1987年，默沙东将成功洛伐他汀推向市场。1979年2月，他汀药之父、日本药学家远藤章在红色红曲霉中获得了一种对HMG-CoA还原酶具有优良抑制活性并能够发挥降血脂作用的化合物，这种化合物命名为 Monacolin K。有意思的是，后来证明洛伐他汀 就是内酯式Monacolin K。中国药典中也收录了以红曲为原料制备的血脂康片和血脂康胶囊。

 内酯式Monacolin K                                        酸式Monacolin K

随便讲下，远藤章第一个制备了降血脂他汀药美伐他汀（mevastatin）的科学家。1976年，三共公司正式启动美伐他汀开发项目，并在Ⅰ期和Ⅱ期临床试验中证实了美伐他汀的安全性和有效性。然而，令人遗憾的是，一项为期两年的犬长期毒性试验中出现了高剂量组的肠道淋巴瘤，因而三共公司不得不在1980年终止了美伐他汀的临床试验。但三共公司坚持研究他汀类药物。三共公司的普伐他汀( Pravastatin)1989年首先在日本上市，后与施贵宝公司合作进行全球化开发，并于1991年在美国上市。

随着红曲的应用越来越广泛 ,人们对其安全性的研究程度也日渐深入。1977年Xingchun Wong等人发现粗萃取的红曲色素(crude pigment)具有抗菌活性，当时将其命名为monascidin A 但在1995年P.JBLANC等人的研究发现其和 penicillium citrinum所产生citrinin在红外吸收光谱、NMR、MS等分析方面具有相同的特征，monascidin A不是新物质，就是早就发现的桔霉素citrinin。

桔霉素的化学结构和降解产物桔霉素H1和桔霉素H2

 Citrinin(桔青霉素、桔霉素、橘霉素 )早在在 1931年就被作为抗生素从青霉属中分离并加以研究，主要要产生菌株有曲霉属 (Aspergillus)、青霉属 (penicillium)和纠缠青霉(P．implication) 等，桔霉素能抑制短芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、金色链球菌等的生长。一度有人认为期可能会开发为药物。但之后的研究表明，Citrinin是一种具有较高毒性的次级代谢产物，与日本黄变米中毒有关。

桔霉素是由脂类代谢产生的一种真菌毒素 , 我们都知道真菌毒素对健康能够产生一系列短期或长期的影响。如短期的中毒现象 ,长期的致癌性及致畸性影响。接触真菌毒素能产生类似皮炎、感冒和流感的症状 ,以及咽喉疼痛、头痛、疲劳、痢疾及免疫功能下降等病症。

桔霉素在大白鼠和小白鼠皮下注射和腹膜内注射的LC50分别为67mg/ kg 和 35mg/ kg ,其毒性属中等偏剧毒性 ,桔霉素作用的靶器官是肾脏 ,可以导致肾肥大。如在猪饲料中每天按 200mg/ kg 的用量加入桔霉素 ,在 1～2 月内会出现肾病。最新研究结果表明 ,桔霉素还对基因有毒性效应。桔青霉素能造成出生8个星期已断奶小鼠的骨髓细胞染色体异常，主要是亚倍体、粘性及凝集性现象出现、染色体结构断裂、偏心片等异常现象出现。

    Durackva 等的研究证实,根据其 LC50值的大小, 桔霉素的毒性与黄曲霉毒素 B1 的毒性处于同一水平(LC50位于 10ug/ ml～100ug/ ml 之间)。桔霉素毒性虽然不如黄曲霉毒 B2 ,国内外仍将其作为食品污染的严格控制指标。包括中国、欧盟、日本等国家和地区都对红曲产品中桔霉素的限值制定了限值，并有法定的分析方法。

这次日本小林制药红曲事件还在发酵。3月26日，日本厚生劳动省公布了第二例因摄取含红曲成分的小林制药保健品所引发的死亡案例，且相关入院治疗人数已增至106人，其中不乏需要透析治疗者；据央视新闻最新报道，3月28日，又有两名生前服用小林制药含红曲成分保健品的消费者死亡，截至目前，小林制药保健品已致4死。早在今年1月，就有一名医生提醒小林制药注意其相关产品引发的健康问题。这段时间里，已陆续有13名小林制药红曲相关产品消费者报告了身体不适，包括出现尿色变化、四肢肿胀和疲劳等症状，且6人已入院治疗。3月22日，小林制药发布了关于该事件的第一个公告，称其在对制造、销售的红曲胆固醇颗粒及其所使用的自制红曲原料进行成分分析后发现，部分红曲原料中可能含有非预期的成分。虽然尚未确定这些成分与肾脏疾病之间的确切关系，但公司还是决定召回三款含红曲产品，数量多达约30万份。3月26日，小林制药报告了一例死于肾脏疾病的消费者案例。据悉，该过世消费者在过去近三年间（2021年4月~2024年2月）持续订购红曲胆固醇颗粒。

从小林公司报告这次事件中的受害者主要是肾脏损伤。这点和桔霉素的毒理数据有些像。但桔霉素的检测标准已经公布了好多年了，小林公司应该是有能力检测桔霉素的，按常理桔霉素不应该是非预期的成分。

红曲作为发酵产品，它的化学成分十分复杂。已知的Monacolin类化合物就有很多。

已知的红曲中的Monacolin类化合物。

红曲中部分已知色素成分（a = rubropunctatin(orange); b = monascorubrin (orange); c = monascin (yellow); d = ankaflavin (yellow); e =rubropunctamine (red); f = monascorubramine (red)）

现在的研究已经证实了红曲中桔霉素的合成路径中，是和色素有共同的起始物料和中间体。

桔霉素和红色素的生物合成路径（左边是红色素，右边是桔霉素）

    色素中已经鉴定出的化合物也有不少。目前对于红曲中毒理研究还是主要集中于Monacolin K和桔霉素。对于红曲中色素和其他Monacolin类物质毒理的研究相对较少，不排除一些色素成分也会具有肾脏毒性。如果发酵中由于发酵条件变化或杂菌污染造成某些组分异常升高或生成未知化合物就可能对消费者造成身体伤害。希望这次能尽快找出药害的原因，防止再次发生。